Hver er besta aðferðin?
— Próf fyrir SARS-CoV-2 sýkingargreiningu
Fyrir staðfest COVID-19 tilfelli, tilkynnt um algeng klínísk einkenni eru hiti, hósti, vöðvaverkir eða þreyta.Samt eru þessi einkenni ekki einstök einkenni COVID-19 vegna þess að þessi einkenni eru svipuð og hjá öðrum veirusýktum sjúkdómum eins og inflúensu.Eins og er, eru víruskjarnsýru rauntíma PCR (rt-PCR), tölvusneiðmyndataka og nokkrar blóðfræðilegar breytur aðal verkfærin til klínískrar greiningar á sýkingu.Mörg rannsóknarstofuprófunarsett hafa verið þróuð og notuð til að prófa sýnishorn sjúklinga fyrir COVID-19 af kínverska CDC1, CDC í Bandaríkjunum2og önnur einkafyrirtæki.IgG/IgM mótefnapróf, sermisfræðileg prófunaraðferð, hefur einnig verið bætt við sem greiningarviðmið í uppfærðri útgáfu Kína af greiningar- og meðferðarleiðbeiningum fyrir nýja kransæðasjúkdóminn (COVID-19), sem gefin var út 3. mars.1.Veirukjarnsýru rt-PCR prófið er enn núverandi staðlaða greiningaraðferðin til að greina COVID-19.
StrongStep®Skáldsaga Coronavlrus (SARS-COV-2)Multiplex Real-Time PCR Kit (uppgötvun fyrir þrjú gen)
Samt þjást þessir rauntíma PCR prófunarsettir, sem leita að erfðaefni veirunnar, til dæmis í nef-, munn- eða endaþarmsþurrkur, af mörgum takmörkunum:
1) Þessar prófanir hafa langan afgreiðslutíma og eru flóknar í rekstri;þær taka yfirleitt meira en 2 til 3 klukkustundir að meðaltali að skila árangri.
2) PCR prófin þurfa löggiltar rannsóknarstofur, dýran búnað og þjálfaða tæknimenn til að starfa.
3) Það eru nokkrar tölur um rangar neikvæðar fyrir rt-PCR af COVID-19.Það getur stafað af lágu SARS-CoV-2 veiruálagi í þurrkusýni úr efri öndunarvegi (Nýjan kransæðavírus smitar aðallega neðri öndunarvegi, svo sem lungnablöðrur) og prófið getur ekki borið kennsl á fólk sem gekk í gegnum sýkingu, jafnaði sig og hreinsað veiruna úr líkama sínum.
Rannsóknir Lirong Zou o.fl4komst að því að hærra veirumagn greindist fljótlega eftir að einkenni komu fram, meira veirumagn greindist í nefi en í hálsi og veirukjarnsýruútskilnaður sjúklinga sem smitaðir eru af SARS-CoV-2 líkist því hjá sjúklingum með inflúensu4og virðist ólík því sem sést hjá sjúklingum sem eru sýktir af SARS-CoV-2.
Yang Pan o.fl5skoðuð raðsýni (hálsþurrkur, hráka, þvag og hægðir) frá tveimur sjúklingum í Peking og komst að því að veirumagn í hálsþurrku og hrákasýnum náði hámarki um 5-6 dögum eftir að einkenni komu fram, hrákasýni sýndu almennt meira veirumagn en sýni úr hálsþurrku.Ekkert veiru-RNA greindist í þvag- eða hægðasýnum frá þessum tveimur sjúklingum.
PCR próf gefur aðeins jákvæða niðurstöðu þegar veiran er enn til staðar.Prófin geta ekki borið kennsl á fólk sem gekk í gegnum sýkingu, náði sér og hreinsaði vírusinn úr líkama sínum.Í raun voru aðeins um 30%-50% jákvæð fyrir PCR hjá sjúklingum með klínískt greinda nýja kransæðaveirulungnabólgu.Ekki er hægt að greina marga nýja kransæðaveirulungnabólgusjúklinga vegna neikvæðra kjarnsýruprófs, svo þeir geta ekki fengið samsvarandi meðferð í tæka tíð.Frá fyrstu til sjöttu útgáfu leiðbeininganna, byggir eingöngu á greiningu á niðurstöðum úr kjarnsýruprófum, sem olli læknum miklum vandræðum. Fyrsti "uppljóstrarinn", Dr. Li Wenliang, augnlæknir hjá Wuhan Central Spítalinn, er dáinn.Á meðan hann lifði fór hann í þrjú kjarnsýrupróf vegna hita og hósta og síðast fékk hann PCR jákvæðar niðurstöður.
Eftir umræður sérfræðinga var ákveðið að auka sermisprófunaraðferðir sem nýtt greiningarviðmið.Þó mótefnapróf, einnig kölluð sermipróf, geta staðfest hvort einhver hafi smitast jafnvel eftir að ónæmiskerfið þeirra hefur hreinsað vírusinn sem veldur COVID-19.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM mótefnahraðpróf
IgG/IgM mótefnapróf mun hjálpa til við að rekja á mun íbúabyggðari hátt hver hefur fengið sýkinguna, vegna þess að mörg tilfelli virðast dreifast frá einkennalausum sjúklingum sem ekki er auðvelt að bera kennsl á.Hjón í Singapúr, eiginmaðurinn prófaði jákvætt með PCR, PCR prófun konu hans var neikvæð, en niðurstöður mótefnaprófa sýndu að hún var með mótefni, eins og eiginmaður hennar.
Sermisfræðilegar prófanir þurfa að vera vandlega staðfestar til að vera viss um að þær bregðist áreiðanlega, en aðeins við mótefnum gegn nýju veirunni.Eitt áhyggjuefni var að líkindin milli vírusa sem valda alvarlegu bráðu öndunarfæraheilkenni og COVID-19 gæti leitt til krossviðbragða.IgG-IgM þróað af Xue Feng wang6var talið vera hægt að nota sem point-of-care próf (POCT), þar sem hægt er að framkvæma það nálægt rúmstokknum með fingurstikublóði.Settið hefur næmi 88,66% og sértækni 90,63%.Hins vegar voru enn rangar jákvæðar og rangar neikvæðar niðurstöður.
Í uppfærðri útgáfu Kína af greiningar- og meðferðarleiðbeiningum fyrir nýja kransæðasjúkdóminn (COVID-19)1, staðfest tilvik eru skilgreind sem grunuð tilvik sem uppfylla eitthvert af eftirfarandi skilyrðum:
(1) Öndunarvegarsýni, blóð- eða hægðasýni reyndust jákvætt fyrir SARS-CoV-2 kjarnsýru með rt-PCR;
(2) Erfðafræðileg raðgreining vírusa úr sýnum úr öndunarfærum, blóði eða hægðum er mjög samhljóða hinu þekkta SARS-CoV-2;
(3) Nýtt kórónavírussértækt IgM mótefni og IgG mótefni voru jákvæð;
(4) Nýtt kransæðasértækt IgG mótefni í sermi breytt úr neikvætt í jákvætt eða kransæðasértækt IgG mótefni á batatímabilinu er 4 sinnum hærra en á bráða tímabilinu.
Greining og meðferð COVID-19
| Leiðbeiningar | Birt | Staðfest greiningarviðmið |
| Útgáfa 7 | 3 mars 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Útgáfa 6 | 18. febrúar 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Tilvísun
1. Leiðbeiningar um greiningu og meðferð nýrrar kransæðaveirulungnabólgu (prufuútgáfa 7, National Health Commission of the People's Republic of China, gefin út 3. mars 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Rannsóknir Notaðu aðeins rauntíma RT-PCR samskiptareglur til að auðkenna 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapúr heldur fram fyrstu notkun mótefnaprófs til að rekja kransæðaveirusýkingar
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4.SARS-CoV-2 veiruálag í sýnum í efri öndunarvegi sýktra sjúklinga 19. febrúar 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Veiruálag af SARS-CoV-2 í klínískum sýnum Lancet Infect Dis 2020 Birt á netinu 24. febrúar 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Þróun og klínísk notkun á hröðu IgM-IgG samsettu mótefnaprófi fyrir SARS-CoV-2
Sýkingagreining XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Pósttími: 17. mars 2020
